挑战是一种特殊的玩法，游戏开始时玩家通常会获得一些指定的道具，但坏处是玩家每一层都会受到诅咒，而且没有宝物房。游戏里一共有二十个挑战：

1.Pitch Black漆黑一片

你看不见你的血量，房间的光线更暗。

有宝物房。

终点：妈腿

解锁方式：自带

解锁：Rune of Hagalaz（摧毁房间里所有可被破坏的物体;一次性可拾取道具）

2.High Brow达官显贵

起始道具：Number One（尿），E. Coli（翔之触），Butt Bombs（翔炸弹），Enema（将所有敌人变成翔;主动），Petrified Poop（饰品）

无宝物房。

终点：妈腿

解锁方式：自带

解锁：Rune of Jera

3.Head Trauma头部创伤

起始道具：Tiny Planet（眼泪围着你转）, Soy Milk（大幅降低攻击，将射速提到堪比technology 2的射速水平）,Small Rock（加攻击） 和 Iron Bar（有几率射出铁眼泪来困惑敌人）

无宝物房。

终点：妈腿

解锁方式：自带

解锁：Rune of Ehwaz（生成一个陷阱门，同We Need To Go Deeper）

4.Darkness Falls黑暗降临

起始道具：Pentagram（加攻击）, Dead Bird（受到攻击放出可以攻击的小鸟）,Whore of Babylon, Razor Blade（自残来加攻击力）,Sacrificial Knife（生成一个匕首在你身边转） 和 Dark Matter（使被打到的敌人受到恐惧效果）

无宝物房。

终点：撒旦

解锁方式：未知

解锁：Rune of Dagaz